一、试验简介

本试验规定了CO2吸收法和氮转化法测定化学农药对土壤微生物毒性的材料、条件、操作、质量控制、数据处理、试验报告等的基本要求。适用于为化学农药登记而进行的土壤微生物毒性试验,其他类型的农药可参照使用。不适用于易挥发和难溶解的化学农药。

二、检测标准

GB/T31270.16—2014化学农药环境安全评价试验准则第16部分:土壤微生物毒性试验

三、试验概述

土壤微生物毒性试验包括CO2吸收法和氮转化法,根据农药登记管理法规及其他规定选择相关方法进行试验。

1、CO₂吸收法在标本瓶内放置两只小烧杯,其中一只盛放土壤,另一只盛放碱液(如NaOH溶液),用于吸收土壤微生物呼吸所释放的CO₂。以模拟农药常用量、10倍常用量、100倍常用量时土壤表层10cm土壤中的农药含量设3种不同处理浓度,将标本瓶密闭并置于25°C±1°C、黑暗条件下培养,并保持土壤含水量为最大田间持水量的40%~60%,于试验开始后的第1天、第2天、第4天、第7天、第11天、第15天更换出密闭瓶中的碱液,测定吸收的CO₂量。评价供试物对土壤微生物活性的影响。

2、氮转化法过筛的土壤与适量有机底物混合后用供试物处理,同时设置一组不加供试物的对照。试验至少需设置2个测试浓度,可参考供试物田间最大施用量设置。将土壤置于黑暗、20°C±2°C的条件下培养,并保持土壤含水量为最大田间持水量的40%~60%,在培养0d、7d、14d和28d后,从处理组和对照组中取出一定量的土壤样品,用合适的溶剂浸提并测定提取液中硝酸盐的含量。比较处理组与对照组的硝酸盐形成率,计算处理组相对于对照组的百分比差异。试验至少持续28d,如果第28天处理组与对照组的差异不小于25%,则试验需延长,最长至100d。

四、试验结果评定

农药对土壤微生物毒性的毒性等级划分：

（1）CO₂吸收法 

CO₂吸收法中,农药对土壤微生物的毒性分成三个等级:土壤中农药加量为常量,在15d内对土壤微生物呼吸强度抑制达50%则划分为高毒;土壤中农药加量为常量10倍,能达到上述抑制水平的,划分为中毒;土壤中农药加量为常量100倍,能达到上述抑制水平的,划分为低毒;若三种处理均达不到上述抑制水平,则同样划分为低毒。

（2）氮转化法

在试验28d后的任何时间所取样品,若测定其低浓度处理组和对照组的硝酸盐形成速率的差异不大于25%,则可认为该农药对土壤中的氮转化没有长期影响。

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